Microbiología
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Examinando Microbiología por Autor "Abrahams Sandí, Elizabeth"
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Ítem Caracterización de dos aislamientos clínicos autóctonos de Naegleria fowleri: determinación de factores de virulencia y susceptibilidad a fármacos comerciales(2023) Chacón Camacho, Natalia; Abrahams Sandí, ElizabethLas amebas de vida libre son protozoarios asociados a infecciones incidentales humanas del sistema nervioso central. Existen tres géneros principales causantes de estas infecciones (Acanthamoeba, Balamuthia, y Naegleria), y dentro del género Naegleria, la especie termófila Naegleria fowleri es la única patógena. Esta ameba está distribuida globalmente y causa una rara y severa enfermedad llamada meningoencefalitis amebiana primaria (MAP), especialmente en niños y jóvenes que practican actividades acuáticas recreacionales. Debido a la falta de estrategias diagnósticas rápidas y tratamientos eficaces, esta infección tiene una tasa de mortalidad de más del 97%. En Costa Rica se han diagnosticado 3 casos de MAP, todos durante el año 2020, de los cuales fue posible obtener los primeros dos aislamientos en cultivo axénico en la historia del país, denominados Guanacaste (Gu) y Limón (Li). El objetivo del presente trabajo es comparar los factores de virulencia y perfiles de susceptibilidad a fármacos comerciales de estos dos aislamientos autóctonos de N. fowleri. Para esto, se realizaron electroforesis SDS-PAGE y zimografías para evaluar el perfil proteico total y de proteasas, respectivamente. Además, se evaluó el efecto citopático de los trofozoítos y los medios condicionados (MC) sobre la línea celular Vero, mediante una serie de experimentos que incluyeron tinciones con cristal violeta, pruebas de viabilidad mediante la cuantificación de deshidrogenasa láctica (DHL), pruebas de viabilidad con el reactivo PrestoBlue® y un estudio proteómico para identificar las principales proteínas secretadas. Finalmente, se evaluaron las concentraciones mínimas inhibitorias 50% (MIC50, por sus siglas en inglés) de la anfotericina B, miltefosina y voriconazol sobre los aislamientos. Los resultados indican que los aislamientos presentan perfiles proteicos similares y proteasas de serina...Ítem Determinación de características asociadas al potencial patogénico de aislamientos de Acanthamoeba, obtenidos a partir de muestras de equipos de la Universidad de Costa Rica(2015) Castro Artavia, Esteban; Abrahams Sandí, ElizabethLas amebas de vida libre juegan un rol importante en salud pública por su capacidad de generar cuadros clínicos y su amplia distribución en diversos ambientes relacionados con el ser humano. En particular, el género Acanthamoeba es un género de importancia, ya que puede producir encefalitis granulomatosa amebiana en individuos inmunosupresos, un cuadro clínico que la mayoría de veces es fatal, así como queratitis amebiana en individuos inmunocompetentes. Aparte de estos dos cuadros clínicos, se reportan también otros a nivel cutáneo y pulmonar. Además de su importancia médica como agentes productores de enfermedad en el ser humano y animales, es conocida la capacidad de este género de funcionar como transportadores de bacterias y virus con potencial patogénico. Dada la importancia clínica de Acanthamoeba y debido a la poca información que existe sobre amebas de vida libre en Costa Rica, con este trabajo se pretendió determinar algunas características asociadas al potencial patogénico en diferentes aislamientos de amebas del género Acanthamoeba, obtenidos a partir de muestras recolectadas en unidades dentales de la Facultad de Odontología, unidades de aire acondicionado de la Facultad de Microbiología y unidades combinadas de emergencia de los laboratorios de la Facultad de Química, todos ubicados en la Universidad de Costa Rica. A los diferentes aislamientos se les realizó una batería de pruebas para evaluar posible patogenicidad, las cuales incluyeron pruebas de termotolerancia y osmotolerancia, determinación de la producción de proteasas extracelulares mediante zimografía y evaluación de efecto citopático en cultivo celular mediante la cuantificación de los niveles de DHL y microscopía de luz. Para cumplir con los objetivos del proyecto, se trabajó con 21 aislamientos primarios de Acanthamoeba, provenientes de unidades dentales de la Facultad de Odontología...