Maestría Académica en Ciencias Biomédicas con énfasis en Bioquímica y Fisiología Celular
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Ítem Caracterización bioquímica del veneno del escorpión Didymocentrus krausi (Scorpiones: Scorpionidae)(2016) Rojas Azofeifa, Daniela; Sasá Marín, Mohammad JihadLos venenos de escorpiones están compuestos por diferentes mezclas de sustancias, entre ellas neurotoxinas, péptidos sin puentes disulfuro, moco, sales, componentes orgánicos y enzimas. Algunos de los efectos que estos venenos pueden presentar a nivel celular son: prolongación del potencial de acción en células excitables, actividad proteolítica, efectos en la permeabilidad de las membranas celulares, producción de interleucinas y óxido nítrico en macrófagos. A nivel sistémico pueden afectar el sistema autónomo y desencadenar un fallo multiorgánico. Muchos de los venenos de escorpiones estudiados, corresponden a especies de la familia Buthidae, debido a que presentan más accidentes letales, pero se ha dejado de lado otras especies que poseen características únicas en su veneno y que no pertenecen a esta familia de escorpiones. Uno de estos es Didymocentrus krausi (Scorpionidae), por lo que el objetivo principal de este proyecto fue caracterizar parcialmente el veneno e identificar los principales componentes presentes en el veneno de este escorpión que habita la región noroeste de Costa Rica. Con la finalidad de analizar los distintos componentes del veneno, este se separó por HPLC-RP para su posterior caracterización por medio de espectrometría de masas MALDI-TOF-TOF, nESI-MS/MS, además se incorporó la construcción de una biblioteca de ADNc. Por otra parte, se determinó la actividad citotóxica del veneno con el ensayo calorimétrico de sulforodamina B, en células excitables y no excitables, así como su actividad proteolítica con la prueba de azocaseína y producción de óxido nítrico en macrófagos, por medio de la prueba de Griess. RESUMEN Marco Teórico: Los venenos de escorpiones están compuestos por diferentes mezclas de sustancias, entre ellas neurotoxinas, péptidos sin puentes disulfuro, moco, sales, componentes orgánicos y enzimas. Algunos de los efectos...Ítem Desarrollo de modelos representativos para el estudio de cáncer gástrico y evaluación de agentes con potencial antitumoral en células de cáncer gástrico primario y de mestástasis gástrica en hígado(2012) Ortiz Chaves, Natalia; Díaz Oreiro, Cecilia, 1964-El cáncer gástrico es la sexta neoplasia más común a nivel mundial y la primera causa de muerte por tumores en Costa Rica, la sobrevida de los pacientes se ve limitada por dificultades en el diagnóstico y la carencia de opciones terapéuticas que permitan mejorar la expectativa de vida. En el siguiente estudio se efectuaron una serie modelos de investigación que permitirán e.n un futuro comprender mejor la patología de este tumor y se evaluó la acción terapéutica de retinoides de origen natural y sintético en células de cáncer gástrico. Por medio de la inducción química con MNNG se logró establecer un modelo in vivo de carcinogénesis en estómagos de ratas Wistar, en el cual fue posible observar la aparición de tumores en el epitelio estratificado plano queratinizado a partir de la semana 22 de iniciado el ensayo, mientras que para la semana 40 se observaron adenomas en el epitelio cilíndrico simple. Adicionalmente se procuró investigar el papel de la bacteria Helicobacter pylori en el desarrollo del cáncer gástrico por medio de la inoculación de dos cepas de la bacteria {CagA+ y CagA-) en el estómago de ratas Wistar, así como el efecto de su administración en conjunto con el MNNG, sin embargo los resultados de estos modelos estuvieron limitados debido a la ausencia de detección de la bacteria en los estómagos de las ratas inoculadas. Además, se estableció un modelo in vitro de cultivo celular tridimensional, el cual permite reproducir ciertas de las características observadas in vivo en los tumores, en este caso se pudo determinar que las dos líneas celulares de cáncer gástrico presentaron un comportamiento distinto, ya que las células NCl-N87 provenientes de una metástasis gástrica en hígado lograron formar esferoides compactos mientras que las células AGS que son originarias de un tumor primario formaron estructuras fácilmente dispersables...Ítem Aislamiento, purificación y caracterización de una lectina de la semilla del poro (Erythrina costarricensis)(1988) Nanne Echandi, Clara Isabel; Aragón Órtiz, FedericoA partir del extracto crudo, de la semilla de Erythrina costaricensis se purificó la lactina utilizando tres tipos de cromatografía; filtración por gel con Sephadex G-100, intercambio iónico con DEAE-Sephadex A-50 y afinidad con galactosa acoplada covalentemente a sefarosa. Por medio de la electroforesis en gel de acrilamida se demostró la presencia de una sola banda protéica. El peso molecular obtenido por filtración en Sephadex G-100 fué de 58 KDa y por gel de acrilamida en presencia de S.D.S. de 29,51 KDa. La lactina se puede considerar fundamentalmente como un dímero formado por dos subunidades de aproximadamente el mismo peso molecular, no enlazadas por puentes disulfuro. Utilizando el isoelectroenfoque analítico se pudo demostrar la presencia de no más de cuatro isolectinas con puntos isoeléctricos de 5,70, 5,90, 6, 13 y 6,50. La lactina es una glicoproteína con 6,50 por ciento de azúcares neutros en su molécula exenta de ácido siálico. Su acción aglutinante se demostró con eritrocitos de conejo y pollo. No se encontró actividad aglutinante con los eritrocitos de caballo, cabra, carnero y rata. Los iones calcio y manganeso son potenciadores de la actividad hemaglutinante mientras que el E.D.T.A. ejerce un efecto inhibidor. La lactina es estable hasta 70 C y en ámbito de pH de 2 a 1o. No se encontró efecto vasopresor al inyectar la lactina intravenosamente en ratas Sprague-Dowley.