Maestría Académica en Microbiología
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Examinando Maestría Académica en Microbiología por Autor "García Santamaría, Fernando"
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Ítem Caracterización fenotípica y molecular de Metalo-B-Lactamasas en aislamientos hospitalarios de Pseudomonas aeruginosa(2008) Toval Maldonado, Francisco; García Santamaría, FernandoSe estudiaron 198 aislamientos de Pseudomonas aeruginosa recuperados del Hospital México entre noviembre 2004 y octubre 2005. Debido a la resistencia mostrada a los carbapenemes, se investigó la presencia de las metalo-ß-lactamasas IMP, VIM, SPM-1, GIM-1 y SIM-1 mediante E- test MBL y PCR múltiple. Además, se estudió la posible asociación con integrones de clase 1 mediante PCR y secuenciación de los cassettes génicos y se compararon los aislamientos metalo-ß-lactamasas (MBL) positivo con la técnica RAPO empleada por Madriz-Garita. Los dos hallazgos más relevantes de la presente investigación son la presencia de dos genes diferentes, blaIMP y bLaVIM, en la mayoría de los aislamientos de Pseudomonas aeruginosa resistentes a carbapenemes, y que ambos genes no están, aparentemente, asociados a integrones de clase 1. Los resultados de la secuenciación de la región variable de los integrones de clase 1 mostró la presencia de los genes aacA4, aadA2, aadA6, orfD y qacF distribuidos en 18 aislamientos sensibles a imipenem y meropenem, mientras que, aunque los aislamientos MBL positivo presentaron integrones de clase 1, no se obtuvo amplicones con los primers 5'CS y 3'cs utilizados para determinar la presencia de cassettes génicos. Un tercer hallazgo significativo es que los aislamientos de P. aeruginosa portadores de los genes blaIMP y blaVIM pertenecen a varios grupos o clones genéticamente diversos, por lo que cabe la posibilidad de plásmidos conjugativos u otros elementos genéticos móviles que efectúen una transferencia horizontal de blaIMP y blaVIM simultáneamente entre diferentes cepas de P. aeruginosa.Ítem Patrones de expresión de los genes para las metalo B-Lactamasas BLA IMP-18 y BLA VIM-2 en la cepa Pseudomonas aeruginosa AG1 resistente a Carbapenems(2018) Chinchilla Montero, Diana; García Santamaría, FernandoLa cepa Pseudomonas aeruginosa AG1 es un aislamiento clínico multiresistente a antibióticos que posee genes codificantes por las metalo β-lactamasas b/a1MP-18 y b/av1M-2. las cuales contribuyen a su elevada resistencia a carbapenems. Estos genes se encuentran como cassettes ubicados en integrones independientes y con un arreglo genético no descrito aún en la literatura para otros aislamientos. Se realizó un análisis de los niveles de expresión de b/a1MP-1s y b/av1M-2 por medio de cuantificación absoluta y relativa por RT-PCR en tiempo real bajo diferentes condiciones de cultivo y se analizó el efecto de concentraciones subinhibitorias de antibióticos sobre la tasa transcripción de estos genes. Se determinó que ambos genes bla se expresan a niveles relativamente semejantes, siendo los niveles de expresión ligeramente mayores para b/a1MP bajo las condiciones analizadas. El efecto de la posición de/ cassette y la fuerza del promotor sobre la expresión de los cassettes de los genes bla es similar. Adicionalmente, se determinó que en presencia de concentraciones subinhibitorias de antibióticos, se producen perturbaciones cuantificables en el nivel de expresión de los genes codificantes por MBLs, actuando el imipenem y la tobramicina como inductores de la expresión.