Examinando por Autor "Arrieta Espinoza, Griselda"
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Ítem Determinación de la respuesta de cultivares de arroz criollo (Oryza sativa L.) costarricense a linajes de Pyricularia oryzae Cavara mediante pruebas de virulencia en condiciones de invernadero(2019) Barrantes Rojas, Jose Pablo; Arrieta Espinoza, GriseldaEl hongo Pyricularia oryzae Cavara es un ascomicete conocido como el agente causal del tizón del arroz. Esta enfermedad se localiza en cualquier país donde se cultive arroz y puede generar pérdidas de hasta el 100% si no se controla a tiempo. Una de las principales formas de combate es mediante el desarrollo de variedades resistentes, para esto se deben encontrar materiales que sirvan como donadores de genes, tales como el arroz criollo. Estas plantas representan un reservorio genético de gran importancia, ya que las condiciones de producción las obliga a generar tolerancia a factores, tanto, bióticos como abióticos. En este trabajo se seleccionaron los linajes CRL-2, CRL-3 y CRL-9A pertenecientes a la colección de P. oryzae del Centro de Investigación en Biología Celular y Molecular (CIBCM). Con estos aislamientos se realizaron pruebas de virulencia a 18 cultivares de arroz criollo costarricense (Beto Bolas, Chento Buril, Chin-chin, Chombo, Fortuna negro, Lagunero, Mexicano del incendio, Nira Blanco, Nira Colorado, Pai Caracol, Picaporte, Punta Morada, Rexorito, Rosita, Texas, Tres Mesinos, Tres Mesinos Blanco y Tres Mesinos Colorado), y como testigos, dos variedades costarricenses (CR-5272 y Palmar 18), dos diferenciales internacionales (IRBLi-F5 e IRBLk-ka), dos controles resistentes (Irat 13 y Oryzica Llanos 5) y un dispersor universal (Fanny). Estas pruebas fueron realizadas en condiciones de invernadero, aplicando soluciones de conidios a una concentración de 1×105 conidios/ml. Se realizaron tres réplicas del ensayo, donde se evaluó la severidad (porcentaje de área foliar afectada) a los 21 días después de la inoculación y finalmente se calculó la frecuencia de resistencia (FR) de cada variedad. Los 18 materiales de arroz criollo fueron altamente resistentes a los tres linajes evaluados y nueve de estos mostraron valores de FR del 100% De las variedades testigo...Ítem Determinación de la tolerancia del arroz silvestre Oryza glumaepatula al hongo Pyricularia oryzae, en invernadero(2016) Turcios Rodríguez, Marcela; Arrieta Espinoza, GriseldaLas plantas silvestres de arroz son un reservorio genético de gran importancia en programas de mejoramiento genético debido a que pueden tener resistencia a factores bióticos o abióticos. En Costa Rica, es posible encontrar poblaciones de la especie Oryza glumaepatula, por lo cual se pueden realizar estudios enfocados en la tolerancia a factores que actualmente afectan la producción de arroz a nivel mundial, como por ejemplo la enfermedad conocida como el añublo del arroz causado por el hongo Pyricularia oryzae. Las variedades con resistencia a esta enfermedad pierden esta característica al realizar siembras intensivas, por lo que la búsqueda de genes resistentes a este patógeno se ha intensificado. En este trabajo se utilizaron dos cultivos monospóricos del hongo P. oryzae, el 222-2-5 (Linaje CRL-9A) y el 222-6-2 (Linaje CRL-12), del laboratorio de Mejoramiento Genético de Cultivos del Centro de Investigación en Biología Celular y Molecular (CIBCM) de la Universidad de Costa Rica. Se estudió el efecto del medio de cultivo a base de semolina de arroz-agar con y sin suplemento de sacarosa en dos condiciones lumínicas de crecimiento, luz continua y fotoperiodo (12h luz/12h oscuridad), durante un periodo de 21 días. La producción de conidios en ambos cultivos monospóricos de P. oryzae incrementó en condiciones de fotoperiodo, incluso para el monospórico 222-6-2 se obtuvo una concentración de 2.8×105 conidios/ml en medio de cultivo semolina de arroz con sacarosa. Sin embargo, el efecto de la adición o falta de sacarosa en el medio de cultivo a base de semolina de arroz no fue determinante para uno de los monospóricos (222-6-2). Estas diferencias en comportamiento podrían atribuirse a que los monospóricos provienen de distintos linajes (222-2-5 al linaje CRL- 9A y el monospórico 222-6-2 al Linaje CRL-12). Se realizaron pruebas de virulencia con el monospórico 222-2-5 en platas adultas de las variedades de arroz CR-5272Ítem Estudio de la adaptabilidad de híbridos resistentes o susceptibles a imidazolinonas producidos entre el arroz maleza y la variedad comercial de arroz CFX-18(2015) Orozco Portuguez, Adriana; Arrieta Espinoza, GriseldaEl arroz maleza se define como un grupo heterogéneo de plantas del género Oryza, que compiten directamente por recursos nutricionales y energéticos con las variedades de arroz comercial, y tienen un impacto negativo en el rendimiento del cultivo. Se han desarrollado variedades de arroz resistentes a imidazolinonas como método de control para las arvenses, tal es el caso del arroz cultivo Clearfield ®, obtenido mediante mutaciones inducidas. Esta tecnología consiste en la aplicación de herbicidas que no sean tóxicos para la variedad, pero sí para todas aquellas plantas que no tengan la mutación que otorga la resistencia. Sin embargo, se ha reportado la hibridación entre el arroz maleza y las variedades resistentes a imidazolinonas, lo que ha producido un aumento en la tolerancia al herbicida por parte de las formas arvenses, lo que dificulta su selección y eliminación. Por lo tanto, el objetivo de este estudio se enfocó en el estudio de la competitividad entre biotipos híbridos entre el arroz maleza y el arroz cultivado Clearfield ® variedad CFX-18, que portan el rasgo de resistencia o susceptibilidad a las imidazolinonas en condiciones de invernadero. Se sembraron plantas de arroz maleza tanto resistentes como susceptibles a las imidazolinonas, que provenían de una misma planta híbrida de arroz maleza y la variedad comercial CFX-18, la cual fue recolectada en el campo. Las plantas utilizadas en los análisis de competencia fueron sometidas a estudios moleculares mediante PCR alelo específico para verificar el genotipo del gen Acetolactato Sintasa (ALS). Se utilizó un modelo de series de reemplazo con seis tratamientos, cada uno con diez plantas; dos de los tratamientos corresponden a plantas en monocultivo del biotipo resistente (100R:0S) y del biotipo susceptible (0R:100S). Los cuatro tratamientos restantes corresponden a cultivo mixto de plantas resistentes (R) y susceptibles (S), con las proporciones 80R:20S, 60R:40S, 40S:60S...Ítem Estudio de la hibridación del arroz silvestre Oryza glumaepatula con variedades de arroz cultivado (O. sativa) y silvestre (O. grandiglumis)(2015) Villalobos Cascante, Eddier; Arrieta Espinoza, GriseldaEn esta investigación se estudió el proceso de hibridación interespecífica de la especie silvestre O. glumaepatula con variedades comerciales de la especie O. sativa y con O. grandiglumis mediante evaluación morfológica y citometría de flujo de híbridos. Se produjeron y evaluaron plantas híbridas producto del cruce entre O. glumaepatula, ubicada en el humedal del Río Medio Queso y dos variedades de O. sativa, Puita lnta y CFX- 18 resistentes a un herbicida. Se utilizó la técnica de Cadena de Reacción de Polimerasa Oligonucleótido Alelo Específica (PCR- ASO) para detectar las mutaciones alélicas en el gen ALS que confieren la resistencia al herbicida, y así confirmar la naturaleza híbrida de las plantas obtenidas en los cruces. En total se obtuvieron 68 híbridos O. glumaepatula x P. lnta, 21 híbridos P. lnta x O. glumaepatula, 4 híbridos O. glumaepatula x CFX-18 y 15 híbridos CFX-18 x O. glumaepatula. Se evaluaron 10 descriptores morfológicos del género Oryza y se determinó que independientemente de la dirección y tipo de cruce, los híbridos se asemejan a la especie silvestre O. glumaepatula para los caracteres: altura, longitud de la panícula y longitud de la lígula. Así mismo, todos los híbridos presentaron similitud a las variedades comerciales en la longitud de la hoja bandera. Para los demás caracteres evaluados, dichos híbridos presentaron efecto materno, heterosis y valores intermedios. Por otro lado, se estandarizó el protocolo de citometría de flujo (CFM) para especies del género Oryza y se analizó el contenido de ADN nuclear de 106 muestras de tejido foliar de las especies silvestres O. glumaepatula, O. grandiglumis y de los híbridos naturales producto del cruce entre estas especies, identificados morfológicamente por Zamora et al. (2003). Se determinó que el contenido de ADN nuclear para el híbrido O. glumaepatula x O. grandiglumis en promedio es de 0.73 picogramos, que resultó ser intermedio...Ítem Estudio sobre la producción de conidios in vitro de dos linajes del hongo Magnaporthe oryzae y su capacidad infectiva: efecto del tipo de medio de cultivo, la condición lumínica y tiempo de inducción(2017) Sibaja Barboza, Roy; Arrieta Espinoza, GriseldaEl hongo ascomicete Magnaporthe oryzae es el agente causal del tizón del arroz. Esta enfermedad provoca reducción en la calidad y el rendimiento de este cultivo, por lo que es de gran importancia la evaluación de materiales genéticos resistentes a este patógeno. Para tal efecto, es necesaria la inoculación con concentraciones altas de conidios con el fin de tener una respuesta hospedero patógeno exitosa. El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto de la utilización de diferentes medios de cultivo, la condición lumínica y el tiempo de incubación del hongo sobre la cantidad de conidios y capacidad infectiva de 2 cultivos monoconidiales de distinto linaje genético del hongo Magnaporthe oryzae cultivado in vitro. Para esto se utilizaron los cultivos monoconidiales 222-2-5 y 222-6-2, los cuales fueron sometidos a los medios de cultivo: salvado de arroz-agar (ASA), agar avena (OMA) y agar compuesto (AC), así como a luz blanca y negra, en condiciones de fotoperiodo y luz continua. Además, se evaluaron tiempos de incubación de 7, 15 y 21 días con el fin de favorecer el proceso de conidiación del micelio. En todos los experimentos se evaluó la concentración en conidios/ml. Se determinó que para el cultivo 222-2-5 se presentaron concentraciones más elevadas en los medios salvado de arroz-Agar y avena agar, con concentraciones de 2,01x105 conidios/ml y 1,49 x105 conidios/ml, mientras que para el 222-6-2, no se observaron diferencias en las concentraciones de conidios de los medios analizados. Con respecto a la condición lumínica, la luz negra continua permitió la obtención de concentraciones de conidios menores que los demás tratamientos en 222-2-5. (3,19x104 conidios/ml) y en 222-6-2 (1,54x104 conidios/ml). Las concentraciones de conidios en condiciones de luz negra fotoperiodo, luz blanca continua y luz blanca fotoperiodo no presentaron diferencias en cuanto a la concentración...Ítem Hibridación entre biotipos de arroz maleza y variedades resistentes a imidazolinonas: análisis morfológico y vigor híbrido(2015) Vásquez Céspedes, Elena,; Arrieta Espinoza, GriseldaEl arroz maleza es un conjunto de plantas del género Oryza que son perjudiciales para la producción del arroz cultivado (Oryza saliva) en el mundo. Las variedades de arroz resistentes a imidazolinonas han sido empleadas como método de control, ya que permiten la aplicación de herbicidas que no sean tóxicos para el cultivo, pero sí para las plantas arvenses. Sin embargo, la hibridación entre el arroz maleza y estas variedades es posible, y en nuestro país se ha observado un aumento en la tolerancia al herbicida por parte de las formas maleza, lo que dificulta su selección y eliminación. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue determinar los rasgos morfológicos y reproductivos que predominan y persisten en las plantas híbridas resultantes del cruce entre arroz maleza y variedades resistentes a imidazolinonas, en las primeras dos generaciones (H1 y H2). Para esto, se realizó cruces manuales dirigidos entre arroz maleza (5 morfotipos) y dos variedades resistentes a imidazolinonas (CFx-18 y Puitá INTA), en condiciones de invernadero. Las líneas parentales y las plantas híbridas resultantes fueron caracterizadas mediante 8 rasgos morfológicos. Se evaluaron un total de 403 plantas híbridas obtenidas en los cruces y 137 plantas de las líneas parentales. Se determinó una alta variación morfológica en los rasgos caracterizados en plantas híbridas y no se observan períodos uniformes de floración (96-116 DDS). Características como el ancho de la hoja bandera, la longitud de la panícula y el número de semilla total son superiores en los híbridos en comparación con las líneas parentales. Además, el número de semilla llena presenta heterosis negativa en Hl, con un aumento no mayor a los padres en H2. La resistencia al herbicida, se detecta en todas las plantas híbridas H1 y se observa segregación en la proporción 1:2:1 en H2. Los resultados de la presente investigación indican que la hibridación entre el arroz maleza...Ítem Transformación de arroz (Oryza sativa) vía Agrobacterium tumefaciens: expresión transitoria de genes marcadores en callos pro-embriogénicos(2012) Aguilar Bartels, Cindy; Arrieta Espinoza, GriseldaAgrobacterium tumefaciens contiene el plásmido (Ti) que permite la integración en el genoma de la planta de genes (T-ADN) que se encuentren flanqueados por las secuencias RB (extremo derecho) y LB (extremo izquierdo). Por ello, se utiliza para modificar genéticamente cultivos de importancia agrícola y económica. El objetivo de este trabajo fue evaluar la expresión transitoria de los genes marcadores gusA y hptII en callos pro-embriogénicos de arroz (Oryza sativa ssp. indica) transformados vía Agrobacterium tumefaciens. Para esto se utilizaron las variedades de arroz CR5272 y Nipponbare y la cepa de Agrobacterium tumefaciens LBA4404 transformada con el vector binario pCAMBIA 1305.2. El protocolo de transformación se basó en el protocolo descrito por Reddy (2008), el cual se modificó para la realización de esta investigación mediante variaciones de las concentraciones de acetosiringona, condiciones de luminosidad durante la inducción de callo antes del co-cultivo con la bacteria y la edad de los callos a transformar. Por otra parte, se realizó un experimento de biobalística con el vector pCAMBIA 1305.2 como control positivo de expresión. En todos los experimentos se evaluó el porcentaje de expresión transitoria del gen gusA (coloración azul en presencia del sustrato ß-galactocidasa) y el porcentaje de expresión transitoria del gen hptII (callos con crecimiento o necrosis en medio de en medio de cultivo suplementado con higromicina). Para la variedad CR-5272, se obtuvo entre un 1 y 5% de la expresión transitoria del gen gusA, mientras que para la variedad Nipponbare subespecie japonica fue de un 8%. En el caso del gen hptII se obtuvo entre un 1 y 4% de los callos provenientes de la variedad de la subespecie indica y 20% de la japonica crecieron en el medio de cultivo suplementado con higromicina. En contraste, en el caso del experimento de transformación con biobalística un 100% de los callos expresaron en forma transitoria...