Examinando por Autor "Altamirano Silva, Pamela"
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Ítem Caracterización de grumos extracelulares de Brucella abortus(2023) Vargas Moya, María Tiffany; Altamirano Silva, PamelaBrucella abortus es una bacteria que se encuentra mundialmente distribuida y es causante de la enfermedad conocida como brucelosis, la cual puede afectar tanto a seres humanos como a otros animales mamíferos, incluyendo ganado bovino. Entre las manifestaciones clínicas que se presentan en humanos se encuentran síntomas inespecíficos agudos que pueden volverse crónicos y causar complicaciones más graves; mientras que en animales como vacas es común que cause abortos, bajas en la producción de leche e infertilidad, por ende, genera graves problemas no solo a nivel de salud, sino también pérdidas a nivel económico. B. abortus es un patógeno intracelular facultativo, que una vez que infecta a las células forma vesículas contenedoras de Brucella (VCB), las cuales, en conjunto con diferentes factores de virulencia le permiten redirigir su tránsito intracelular, con el fin de sobrevivir y multiplicarse. Estudios previos han mencionado la presencia de grumos bacterianos extracelulares que podrían estar relacionados a estas vesículas y su salida del espacio intracelular. En esta investigación se realizó una caracterización de los grumos extracelulares de Brucella abortus para compararlos con las vesículas que contienen a Brucella (VCB), específicamente con las VCB autofágicas de Brucella (VCBa), relacionadas con las últimas etapas del tránsito intracelular. Para esto se efectuaron ensayos in vitro en células HeLa y RAW, donde en diferentes tiempos post infección se realizó incubaciones con factor necrotizante citotóxico de Escherichia coli (CNF), lo cual permitió incrementar la formación de grumos intracelulares. Además, se purificaron grumos tanto intra como extracelulares, por medio de un protocolo basado en centrifugación a diferentes velocidades, el cual fue estandarizado y optimizado, para finalmente caracterizar dichos grumos mediante marcaje molecular, tinciones de fluorescencia y medición de tamaño.Ítem Descripción de los eventos post-replicativos asociados a la salida de Brucella abortus de células fagocíticas no profesionales HeLa(2023) Rojas Salas, María Paula; Altamirano Silva, PamelaBrucella abortus es un patógeno Gram Negativo intracelular, facultativamente extracelular. El ciclo de vida intracelular de Brucella es importante dentro de la patogénesis de la brucelosis, un paso crítico es la salida de la bacteria de su célula huésped y la diseminación continua de esta. Sin embargo, es un proceso que no se ha estudiado ampliamente. En este trabajo, se realizó la observación de los eventos post replicativos de B. abortus en células HeLa mediante fluorescencia, con el fin de describir posibles mecanismos de salida de la bacteria. La observación se llevó a cabo utilizando un microscopio automatizado de toma de imágenes continuas. Comprender los mecanismos de salida de Brucella es esencial para avanzar en la investigación de la brucelosis, desarrollar estrategias terapéuticas efectivas y prevenir la propagación de la infección en humanos y animales. Esto tiene importantes implicaciones en la salud pública y medicina veterinaria.