Arrieta Espinoza, GriseldaAguilar Bartels, Cindy2016-08-092021-06-162016-08-092021-06-162012https://repositorio.sibdi.ucr.ac.cr/handle/123456789/2281Proyecto de graduación (licenciatura en ingeniería agronómica)--Universidad de Costa Rica. Facultad de Ciencias Agroalimentarias. Escuela de Agronomía, 2012Agrobacterium tumefaciens contiene el plásmido (Ti) que permite la integración en el genoma de la planta de genes (T-ADN) que se encuentren flanqueados por las secuencias RB (extremo derecho) y LB (extremo izquierdo). Por ello, se utiliza para modificar genéticamente cultivos de importancia agrícola y económica. El objetivo de este trabajo fue evaluar la expresión transitoria de los genes marcadores gusA y hptII en callos pro-embriogénicos de arroz (Oryza sativa ssp. indica) transformados vía Agrobacterium tumefaciens. Para esto se utilizaron las variedades de arroz CR5272 y Nipponbare y la cepa de Agrobacterium tumefaciens LBA4404 transformada con el vector binario pCAMBIA 1305.2. El protocolo de transformación se basó en el protocolo descrito por Reddy (2008), el cual se modificó para la realización de esta investigación mediante variaciones de las concentraciones de acetosiringona, condiciones de luminosidad durante la inducción de callo antes del co-cultivo con la bacteria y la edad de los callos a transformar. Por otra parte, se realizó un experimento de biobalística con el vector pCAMBIA 1305.2 como control positivo de expresión. En todos los experimentos se evaluó el porcentaje de expresión transitoria del gen gusA (coloración azul en presencia del sustrato ß-galactocidasa) y el porcentaje de expresión transitoria del gen hptII (callos con crecimiento o necrosis en medio de en medio de cultivo suplementado con higromicina). Para la variedad CR-5272, se obtuvo entre un 1 y 5% de la expresión transitoria del gen gusA, mientras que para la variedad Nipponbare subespecie japonica fue de un 8%. En el caso del gen hptII se obtuvo entre un 1 y 4% de los callos provenientes de la variedad de la subespecie indica y 20% de la japonica crecieron en el medio de cultivo suplementado con higromicina. En contraste, en el caso del experimento de transformación con biobalística un 100% de los callos expresaron en forma transitoria...spaGENETICA VEGETALEMBRIOGENESIS SOMATICAARROZ - BACTERIOLOGIAINGENIERÍA GENÉTICAproyecto fin de carrera