García Quesada, AndreaChavarría Alvarado, Marianita2024-03-222024-03-222023https://repositorio.sibdi.ucr.ac.cr/handle/123456789/22108Tesis (licenciatura en biología con enfásis en genética y biotecnología)--Universidad de Costa Rica. Facultad de Ciencias. Escuela de Biología, 2023En Costa Rica, así como en otros países, la producción acuícola de camarón ha tenido de forma recurrente la presencia de diferentes enfermedades, que han ocasionado grandes pérdidas económicas. En el año 2009, surgió una nueva enfermedad en China, cuya área de afectación se ha venido expandiendo. La enfermedad de la necrosis aguda del hepatopáncreas (AHPND) provoca mortalidades que pueden alcanzar el 100% en estanques de cultivo. El agente causal de la enfermedad es una bacteria, Vibrio parahaemolyticus, que posee un plásmido que contiene los genes pirA y pirB, que codifican para la síntesis de las toxinas PirA y PirB, responsables de su patogenicidad. En este estudio se investiga la presencia de V. parahaemolyticus y los genes de patogenicidad pirA y pirB en muestras de camarones y agua de estanques de fincas de cultivo de Abangares, Guanacaste, mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), para corroborar su presencia en Costa Rica. Se realizaron los muestreos cada tres o cuatro semanas, durante dos cosechas, una en la época seca y otra en la lluviosa, y se monitorearon los parámetros fisicoquímicos de los estanques. Se extrajo el hepatopáncreas e intestino de los camarones para su macerado; tanto las muestras de agua como de camarón se enriquecieron en Agua Peptonada Alcalina (APW) y se cultivaron en medio Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa (TCBS). Se extrajo el ADN de las muestras y se empleó PCR para detectar la presencia de los genes que codifican para las toxinas PirA y PirB. Los protocolos para la detección de pirA y pirB resultaron en una eficiencia de 110% y 106%, respectivamente. Se confirmó, por primera vez en Costa Rica, la presencia de estos genes en muestras de agua y del intestino de camarones. La frecuencia de aparición en las muestras fue de 43% y 45% en muestras de camarones para los genes pirA y pirB respectivamente, y 31,2% para pirA y 37,5 % para pirB en las muestras de agua...spaBACTERIAS GRAMNEGATIVASBACTERIOLOGIA DEL AGUACAMARONES - ENFERMEDADESENFERMEDADES INFECCIOSASESPECTROFOTOMETROSEXTRACCION (QUIMICA)FLUORESCENCIAPROPIEDADES FISICOQUIMICASREACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA EN TIEMPO REALVIBRIO PARAHAEMOLYTICUS - IDENTIFICACIONVIBRIO PARAHAEMOLYTICUS - PATOGENICIDADproyecto fin de carrera